【海能實驗室】膳食纖維測定儀測定可溶性、不可溶性及總膳食纖維含量

更新時間：2024-05-27

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在追求健康生活的今天，大豆及豆制品

因其豐富的營養(yǎng)價值和多樣的烹飪方式

逐漸成為人們的選擇。

大豆膳食纖維粉

是一種常見的食品原料，

含有豐富的

可溶性和不可溶性膳食纖維，

還含有豐富的氨基酸和少量植物脂肪。

測定大豆膳食纖維粉的膳食纖維含量

對于其質(zhì)量把控、食效分類

具有重要意義。

本方案使用DF06膳食纖維測定儀

對大豆膳食纖維粉進行測定。

實驗方案

儀器

DF06膳食纖維測定儀

K1100全自動凱氏定氮儀

馬弗爐

分析天平

……

儀器準備

1、將濾膜編號，于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為MG后，安裝于過濾漏斗中，并安裝至儀器相應(yīng)位置處。

2、移取350 μLl的熱穩(wěn)定淀粉酶溶液，溶于盛有50 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中；移取3.5 mL的10 mg/mL蛋白酶溶液，溶于盛有47 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中；移取700 μL的葡萄糖苷酶溶液，溶解于盛有50 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中，然后將酶瓶安裝至儀器相應(yīng)位置處。

3、將酶解袋裝于儀器相應(yīng)位置處。

4、確保95%乙醇、純水、順丁烯二酸緩沖液、醋酸溶液的對應(yīng)試劑桶中試劑充足，然后將其與對應(yīng)接頭連接。

樣品制備

本方案采用SOX606索氏提取儀進行樣品的脫脂處理。

精確稱取混勻后的樣品10~12 g（精確至0.1 mg）左右，記為MC。將稱好的樣品轉(zhuǎn)移至濾紙筒中。將盛有樣品的濾紙筒置于儀器萃取室內(nèi)，向溶劑杯中加入沸程30~60℃的石油醚，儀器參數(shù)設(shè)置如下：

抽提完成后，將殘渣烘干至恒重，記為mD。

總膳食纖維測定

1、設(shè)定酶解程序如下：

2、在運行-第一法中選定設(shè)定酶解程序，開始運行，并按照步驟將酶解袋安裝至儀器對應(yīng)位置處，然后按照步驟提示將樣品倒入酶解袋中。（注意避免樣品粘在酶解袋內(nèi)壁高于上壓條的未知，否則應(yīng)用帶針頭的注射器吸取緩沖液將樣品沖入酶解袋，沖洗體積不超過兩毫升）。

3、儀器自動進行酶解、乙酸溶液添加。然后根據(jù)彈窗提示測定（或需添加1 mol/L氫氧化鈉溶液或乙酸溶液調(diào)整）空白、樣品的pH值為4.3±0.2，然后點擊下一步。若需測定不可沉降性膳食纖維（SDFS），則需按照提示加入內(nèi)標物，以進行后續(xù)的液相法測試。

4、儀器自動進行沉淀、抽濾，得到濾液與TDF的殘渣，將附有殘渣的濾紙取出，按照十字折疊后放置于樣品架上，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時）并稱重為M_GR。

5、每兩份殘渣中，一份按照國標《GB 5009.5-2016 食品安全國家標準食品中蛋白質(zhì)的測定》第一法進行消解（推薦試劑量為硫酸銅0.2 g、硫酸鉀3 g、硫酸20 mL，420℃下保溫時間至少為3小時），蒸餾、滴定，計算蛋白質(zhì)質(zhì)量MP；另一份置于馬弗爐中，于550℃下灰化3h測定灰分，計算灰分質(zhì)量M_A。

不可溶性膳食纖維及可溶性膳食纖維測定

1、設(shè)定酶解程序如下：

3、儀器自動進行酶解、乙酸溶液添加。然后根據(jù)彈窗提示測定（或需添加1mol/L氫氧化鈉溶液或乙酸溶液調(diào)整）空白、樣品的pH值為4.3±0.2，然后點擊下一步。若需測定不可沉降性膳食纖維（SDFS），則需按照提示加入內(nèi)標物，以進行后續(xù)的液相法測試。

4、儀器自動進行抽濾，得到濾液與ISDF的殘渣，將附有殘渣的濾紙取出，按照十字折疊后放置于樣品架上，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時）并稱重為M_GR。

5、將過濾漏斗的外斗裝回儀器對應(yīng)位置，點擊下一步，儀器自動加入95%乙醇進行沉淀。

6、沉淀完成后，在儀器上換裝另一套裝有恒重好的濾膜的漏斗及燒瓶，將沉淀好的溶液搖勻并倒入新的漏斗中抽濾。抽濾完成后，按照十字折疊后放置于樣品架上，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時）并稱重為M_GR。

7、每兩份殘渣中，一份按照國標《GB 5009.5-2016 食品安全國家標準食品中蛋白質(zhì)的測定》第一法進行消解（推薦試劑量為硫酸銅0.2 g、硫酸鉀3 g、硫酸20 mL，420℃下保溫時間至少為3小時），蒸餾、滴定，計算蛋白質(zhì)質(zhì)量MP；另一份置于馬弗爐中，于550℃下灰化3h測定灰分，計算灰分質(zhì)量M_A。

結(jié)果、討論與注意事項

1、實驗結(jié)果

實驗選取的大豆膳食纖維粉樣品經(jīng)酶解、抽濾、烘干恒重、測定蛋白和灰分后，得到實驗結(jié)果如下表所示，其中不可溶性膳食纖維（ISDF）的結(jié)果如下：